Histological And Immuno-Histochemical Study OF Submandibular Salivary Gland In Experimentally Induced Diabetes Mellitus In Adultmale Albino Rars

أجريت هذه الدراسة لبيان التغيرات الهستولوچية والهستوكيميائية المناعية التى قد تحدث فى الغدة اللعابية تحت الفكية للجرذان البيضاء بعد الإصابة بمرض البول السكرى بالإضافة إلى توضيح تأثير مرض البول السكرى على بروتين ( ب- س- ل2) ومستقبلات معامل نمو البشرة. و كذلك لإستكشاف دور العلاج بهرمون الأنسولين للمحافظة علي تركيب هذة الغدة.و لهذا الغرض فقد تم استخدام ثلاثين من ذكور الجرذان البيضاء البالغة الأصحاء البدن والتى تتراوح أوزانهم من 180-220 جرام. وقد تم تقسيم هذه الحيوانات إلى ثلاث مجموعات متساوية:- مجموعة (1) أو المجموعة الضابطة وتشمل الحيوانات الصحيحة البدن وتحقن بمحلول ملحي معقم. مجموعة (2) أو المجموعة التجريبية وتشمل الحيوانات المصابة بمرض البول السكرى المحدث بالإستربتوزوتوسين. وقد تعرضوا إلى الإصابة التجريبية بمرض البول السكرى باستخدام الاستربتوزوتوسين‘ بتركيز 60 مج/ كجم، جرعة واحدة تحقن بسرنجة 1 ملم. وتعتبر الحيوانات مصابة بمرض البول السكرى إذا تعدت نسبة السكر فى دمها 14 مل مول. مجموعة (3) أو المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين وتشمل الحيوانات التى تم حقنها بالاستربتوزوتوسين بنفس الجرعة التى استخدمت فى مجموعة (2) ثم معالجتهم بالأنسولين بعد أسبوع واحد من حقن الإستربتوزوتوسين، استمرت معالجة الحيوانات يومياً و ذلك بحقن الأنسولين تحت الجلد بوحدة واحدة كل 24 ساعة لمدة أسبوعين.تم تخدير جميع حيوانات المجموعات الثلاثة بإستنشاق مادة الإثير وذلك بعد مرور ثلاثة أسابيع من تاريخ حقن الإستربتوزوتوسين ثم استخرجت الغدد اللعابية تحت الفكية من الحيوانات بحرص. أعدت كل العينات المأخوذة لفحصها بالمجهر الضوئى وتحضير قطاعات شمعية منها بعد تثبيتها وعمل شرائح سمك الواحدة منها 5 ميكرومتر، تم صبغ العينات بصبغة الهيماتوكسلين والإيوسين لتوضيح التركيب العام للغدة اللعابية تحت الفكية وصبغة المالورى ثلاثية الألوان لتحديد ألياف الكوللاجين وصبغة بيرأيوديك اسيد شيف لتحديد الكربوهيدرات. وصبغة هستوكيميائية مناعية لتحديد بروتين ( ب- س- ل2) ومستقبلات معامل نمو البشرة. كذلك تم إخضاع الشرائح المصبوغة بصبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين لمحلل الصور وذلك لتحديد التغير فى أقطار القنوات بين المجموعات كما تم تحديد المساحة المئوية للشراﺌح المصبوغة بالصبغة الهستوكيميائية المناعية لكل من الـ ( ب- س- ل2) ومستقبلات معامل نمو البشرة.لقد أوضحت نتائج الفحص النسيجى بصبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين للمجموعة الضابطة العلاقة بين الغدة اللعابية تحت الفكية والغدد اللعابية الكبيرة الأخرى وهى الغدة النكفية وغدة تحت اللسان. ووجد أن الغلاف النسيجى الضام للغده اللعابية تحت الفكية يرسل فواصل تقسم الغدة إلى فصوص وفصيصات . تتكون الغدة من حويصلات إفرازية مكتظة ( غالبيتها من النوع الماﺌي)، وجهاز قنوى. الحويصلات ذات الإفرازات المائية لها تجويف ضيق وتغطى بخلايا هرمية الشكل لها سيتوبلازم قاعدي، فاتح، محبب ونوايا دائرية قاعدية. كما أن الجهاز القنوى مكون من أنواع مختلفة من القنوات (القنوات المكبسة، القنوات المحببة الملتوية، القنوات المحززة و القنوات المفرزة).أما بالنسبة لفحص الغدة اللعابية تحت الفكية فى المجموعة المصابة تجريبياً بمرض البول السكرى أظهر الفحص تغيرات فى تركيب الغدة على شكل ظهور مسافات واسعة بين الحويصلات الإفرازية و تشوه وفقد لبعض الحويصلات والقنوات. أيضا ظهر فى بعض المقاطع مناطق تجمع خلايا دهنية و تجاويف فارغة داخل الحويصلات.وبالنسبة لفحص الغدة اللعابية تحت الفكية فى المجموعة المصابة تجريبياً بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين فقد ظهر أن الغدة استعادت الشكل الطبيعى العام حيث أنه لا توجد مسافات واسعة بين الحويصلات ولا يوجد تشوه أو فقد للحويصلات ولا للقنوات ولكن بعض الحويصلات مازال بها تجاويف فارغة وبعضها الآخر سليم.وبفحص الغدة اللعابية تحت الفكية بصبغة المالورى ثلاثية الألوان للمجموعة الضابطة فقد لوحظ ظهور ألياف الكولاجين بكمية بسيطة جداً موزعة بين الحويصلات والقنوات ، كما أنه لوحظ زيادتها فى المجموعة المصابة تجريبياً بمرض البول السكرى، ولكنها قلت فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين.أما بالنسبة لصبغة البيرأيوديك أسيد شيف فقد أوضحت أنه فى المجموعة الضابطة قد ظهر تفاعل قوى فى كل الحويصلات والقنوات وخاصة عند الغشاء القاعدى لها، وأيضاً وجد تفاعل قوى مركز فى القنوات المحززة والذى ظهر خاصة حول التجويف. وقد قل هذا التفاعل فى المجموعة المصابة تجريبياً بمرض البول السكرى. أما فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين فقد زاد هذا التفاعل.وقد تم صبغ الغدة اللعابية بصبغة المايرز هيماتوكسلين لاستخدامها كتفاعل هيستوكيميائى مناعى سلبي لكل من بروتين (ب- س- ل2 ) ومستقبلات معامل نمو البشرة .أما بالنسبة للتفاعل الهيستوكيميائى المناعى لبروتين الـ (ب- س- ل 2) فى المجموعة الضابطة فقد وجد ظهور تفاعل إيجابى شديد والذى ظهر كلون بنى فى سيتوبلازم خلايا كل من الحويصلات الإفرازية والقنوات وقد لوحظ فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى زيادة فى هذا التفاعل حول مناطق تجمع الخلايا الدهنية والحويصلات والذى شوهد فى بعض المقاطع أما فى المقاطع الأخرى بنفس المجموعة فقد لوحظ نقص التفاعل بالمقارنة بما وجد فى المجموعة الضابطة. أما فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين فقد لوحظ تفاعل إيجابى شديد فى السيتوبلازم الخاص بمعظم خلايا الحويصلات الإفرازية والقنوات.وبالنسبة للتفاعل الهستوكيميائى المناعى لمستقبلات معامل نمو البشرة فقد وجد تفاعل ايجابى شديد لخلايا القنوات وبعض خلايا الحويصلات الإفرازية فى المجموعة الضابطة ولكن وجد أنه قد قل فى المجموعة التجريبية المصابة بمرض البول السكرى بالمقارنة بالمجموعة الضابطة. أما فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين فقد وجد أن التفاعل ايجابى شديد لمستقبلات معامل نمو البشرة فى سيتوبلازم خلايا القنوات وبعض خلايا الحويصلات الإفرازية.وبالنسبة للتحليل الإحصائى للنتائج المورفولوچية لأقطار قنوات الغدة اللعابية تحت الفكية فقد وجد أنه قل فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى عن المجموعة الضابطة و المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين، ولكن لا يوجد تغير بين المجموعة الضابطة و المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين. أما التحليل الإحصائى للنتائج المورفولوچية للمساحة المئوية للتفاعل الهستوكيميائى المناعى للـ( ب- س – ل2) فى الغدة اللعابية تحت الفكية فقد وجد أن المساحة المئوية للتفاعل قد قلت جداً فى المجموعة المصابة بالبول السكرى عن المجموعة الضابطة. و فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين قلت المساحة المئوية للتفاعل عن المجموعة الضابطة وكذلك بالنسبة للتفاعل الهستوكيميائى المناعى للمستقبلات معامل نمو البشرة فقد وجد أنه فى المجموعة المصابة بمرض البول السكرى قلت فيها عن المجموعة الضابطة و المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين ولكن لا يوجد فرق بين المجموعة الضابطة و المجموعة المصابة بمرض البول السكرى والمعالجة بالأنسولين .ونستخلص من هذا أن مرض البول السكرى هو واحد من الأمراض الخطيرة التى تؤثر على كل أنسجة و أعضاء الجسم وبخاصة الغدة اللعابية تحت الفكية، لذلك ينصح بسرعة العلاج واستمراره حتى نتجنب مضاعفاته.