| Abstract: |
Fine needle aspiration cytology (FNAC) is considered to be the first step in the work up of patients showing lymph node enlargement. The technique has been found most useful for the primary evaluation of an enlarged lymph node, whether of benign or malignant pathology, the exclusion of a metastatic condition, the primary diagnosis of malignant lymphoma which can be made in 65% to 85% of cases, the selection of a representative node for biopsy, the diagnosis of recurrent lymphoma, for staging the extent of the diseases and for monitoring treatment. However, subtyping of lymphoma based on cytomorphology alone remains a problem due to the diversity of histologic features of malignant lymphoma and the presence of many subclassifications.Application of new techniques (immunocytochemistry and DNA flow cytometry) to cytologic aspirates has solved this problem to a large extent.The present study aimed at evaluating the accuracy of fine needle aspirate biopsy of 65 cases of lymphoproliferative disorders to diagnose and classify cases of NHL according to the REAL/WHO classification system and international working formulation, utilizing clinical data, cytomorphologic features, immunocytochemical panel of lymphoma markers including: CD20, CD45RO, and CD30 and DNA flow cytometry for detection of DNA ploidy pattern and S phase fraction in different types of lymphoproliferative disorders. The results were correlated with the histologic subtypes.The mean age observed in the current work was 49.8 years with the majority of patients detected in the fifth and sixth decades of life. Male predominance was observed among the studied cases (54%). It was found that FNAC, alone, achieved a diagnostic accuracy rate of 70.5%, with 2 false negative cases (3.1%) and 9 cases (13.8%) of suspicious for lymphoma. By adding immunocytochemical markers the diagnostic accuracy increased to 90.8%.In the current study, the results of immunocytochemical reactivity indicates that each marker used has its own sensitivity and specificity. The most accurate one is sensitivity and specificity was CD20 81.8% and 96.6% respectively, which is the B cell marker, then CD45 RO T cell marker 80% and 86.7 and at last CD30 the marker for Reed Sternberg cell, 71.4% and 85.7%. Montypia was found in 71.4% of studied cases and in conguction with cytomorphologic features were highly specific for lymphoma whereas polytypia in suspicious cases did not exclude malignancy.DNA flow cytometry analysis from FNAC material can overcome a technical problem related to most flow cytometric studies that require a mechanical or enzymatic sample disaggregation step which usually give abundant cell debris and fragmented nuclei which may impair the reliability of the method and the accuracy of the data.DNA aneuploidy is a reliable marker of malignant lymphoma as a bimodal DNA histogram indicative of DNA aneuploidy may be obtained from lymphoma tissue but not from benign lymph nodes. In the present study, all aspirates of reactive lymphoid hyperplasia, Hodgkin’s lymphoma and low grade NHL were found DNA diploid 7 aspirates were found DNA aneuploidy from the cases of intermediate and high grade NHL. (32 cases diploid from total 39 cases by 82.1% and 7 cases aneuploid from total 39 cases by 17.9%)The proliferative fraction, as assessed by flow cytometric SPF, is a valuable complementary parameter for grading NHL on FNAC samples.A large SPF (> 10%) is seldom found in benign lymph node. DNA FCM helps to distinguish low grade from high grade lymphomas which require more aggressive chemotherapy.In the present study, mean SPF for reactive hyperplasia was 4.11%, for Hodgkin’s lymphoma was 9.56%, for low grade lymphoma was 4.68%, for intermediate grade was 14.1% and for high grade was 16.96%.It was found to be stepwise higher from reactive to low to intermediate to high grade NHL, which was statistically significant (P < 0.05) between reactive and intermediate & high grade NHL and low vs intermediate & high grade NHL, but not significant between reactive vs low grade lymphoma.CONCLUSIONS1- FNAC when used for diagnosis of lymphoproliferative disorders, it has a diagnostic accuracy of 70.5%. The technique is considered an easy, non invasive, low coast and rapid technique.2- Immunocytochemistry is a very valuable technique in subtyping malignant lymphoma and increasing the accuracy of FNAC to 90.8%. Monotypia (71.4%) in conjunction with cytomorphologic features, were highly specific for lymphoma, whereas Polytypia staining in suspicious cases did not exclude malignancy.3- Immunocytochemical reactivities indicated that each marker used has its own sensitivity and specificity. A selected panel of CD20, CD45 RO and CD30 appeared to be the most helpful approach in this situation.4- DNA flow cytometry is a valuable technique in assessing the proliferative activity of lymphoproliferative disorders.5- DNA aneuploidy is a reliable marker of malignant lymphoma.6- SPF is a valuable complementary parameter for grading lymphoma on FNAC samples to low grade lymphoma < 10% and high grade lymphoma > 10%. SPF > 10% is seldom found in benign lymph node.7- These results were correlated with that of tissue biopsy to evaluate the utility of FNAC for the diagnosis and subtyping cases of lymphoproliferative disorders. However, when subtyping of lymphoma is difficult even with the use of the auxiliary techniques mentioned in the present study, tissue biopsy is usually recommended.عينات إبر الشفط الدقيقة تعتبر الخطوة الأولي في برنامج فحص مرضي تضخم الغدد الليمفاوية. وقد وجد أن هذه الطريقة مفيدة للغاية بخصوص التقييم الأولي لتضخم الغدد الليمفاوية سواء الحميد منه أو الخبيث وبخصوص استبعاد حالات الأورام السرطانية المنتشرة وبخصوص تشخيص السرطان الليمفاوي بنسبة 65% إلي 85% من الحالات وبخصوص اختيار الغدة الليمفاوية المناسبة لأخذ العينة الجراحية وبخصوص تشخيص السرطان الليمفاوي المرتجع وبخصوص معرفة مرحلة المرض وبخصوص معايرة العلاج. ولكن تبقي مشكلة معرفة النوع التفصيلي للسرطان الليمفاوي علي أساس الشكل الخلوي فقط نظراً لتعدد الأشكال النسيجية للسرطانات الليمفاوية ووجود تقسيمات متعددة لها. وقد ساهم في حل هذه المشكلة بدرجة كبيرة تطبيق بعض الطرق الحديثة لمسحات الشفط الخلوية مثل التصنيف المناعي الخلوي الكيميائي ودراسة الحامض النووي الديوكس ريبوزي (د.ن.أ) الكمية بواسطة جهاز السريان الخلوي.هدف البحث والوسائل المتبعة في البحث:وتهدف الدراسة الحالية لتقييم دقة عينات إبر الشفط الدقيقة لخمس وستين حالة من حالات التكاثرات الليمفاوية في تشخيص وتقسيم أنواع الأورام الليمفاوية طبقاً للتقييم الأوروبي الأمريكي المعدل لمنظمة الصحة العالمية وطبقاً لتقسيم صيغة العمل الدولية، وذلك باستخدام البيانات الإكلينيكية والخصائص المظهرية الخلوية واستخدام مجموعة من دلالات الأورام الليمفاوية علي الشرائح الخلوية والتي تساعد علي التصنيف المناعي الكيميائي وتشمل سى د 20 وسى د 45 رو سى د 30، واستخدام طريقة السريان الخلوي للحامض النووي الديوكسى ريبوزي لإكتشاف نمط انقسام الخلايا ونسبة الخلايا في الطور التمهيدي (س) في الأنواع المختلفة من التكاثرات الليمفاوية. وقد تم مقارنة النتائج بالتحليل النسيجي لنفس الحالات بعد أخذ عينات جراحية منها.نتائج البحث:وجد أن متوسط العمر في الدراسة الحالية كان 49.8 سنة وأن أغلب المرضي كانوا في العقد الخامس والسادس من العمر.كما وجد أن أغلب الحالات كانت من الذكور بنسبة 54% ووجد أن دقة إبر الشفط الدقيقة وحدها وصلت إلي 70.5% مع وجود حالتين تشخيص سلبي خطأ (3.1%) وتسع حالات مشكوك في كونها سرطان ليمفاوي (13.8%)، وبإضافة دلالات الأورام المناعية الكيميائية علي الشرائح الخلوية زادت دقة التشخيص إلي 90.8%.وتشير نتائج دلالات الأورام المناعية الكيميائية أن كل علامة من العلامات الكيميائية المناعية المستعملة لها حساسيتها الخاصة وتحديدها الخاص للخلايا المصبوغة. وقد وجد أن أدقهم من ناحية الحساسية والتحديد هو (سي دي 20) والذي كانت نسبة حساسيته 81.8% وهي قدرته علي صباغة خلايا الهدف مع عدم تسجيل نتائج سلبية خاطئة، وكانت نسبة تحديده للهدف 96.6% وهي قدرته علي صباغة خلايا الهدف مع عدم تسجيل نتائج إيجابية خاطئة، وجاء بعده (سى دى 45 رو) بنسبة حساسية 80% وتحديد بـ 86.7%، وفي النهاية جاء (سى دى 30) بنسبة حساسية 71.4% وتحديد 85.7%. وقد وجد أن نسبة الحالات أحادية النوع 71.4% وأن وجود أحادية النوع بالإضافة إلى الصفات الخلوية المظهرية يعتبرا عاملا دقيقا للغاية لوجود السرطان الليمفاوى فى حين أن وجود حالات مشكوك فى كونها سرطان ليمفاوى متعددة النوع لا تنفى وجود السرطان.بالنسبة للقياس الكمي للحامض النووي الديوكسي ريبوزي باستخدام جهاز السريان الخلوي فإن استخدام عينات إبر الشفط الدقيقة تؤدي إلي التغلب علي مشكلة فنية متعلقة باستخدام طريقة السريان الخلوي في العينات الجراحية والتي تحتاج إلي تكسير انزيمي وميكانيكي للعينات والتي ينتج عنها عادم خلايا كبير والتي تؤثر سلباً علي صلاحية ودقة النتائج النهائية.وقد وجد أن اضطراب ازدواجية الحامض النووي مؤشر جيد علي وجود ورم ليمفاوي خبيث حيث أن هذا الإضطراب في الإزدواجية لا يوجد في التضخم الحميد للغدد الليمفاوية.وفي الدراسة الحالية وجد أن كل عينات الشفط من كل التضخمات الحميدة وأورام هودجكن وأورام غير هودجكن الضئيلة الدرجة مزدوجة الحامض النووي. وسبع حالات فقط من أورام غير هودجكن المتوسطة والمرتفعة الدرجة وجد بهم اضطراب في إزدواجية الحامض النووي (عدد حالات ازدواجية الحامض النووي الكلي 32 حالة من أصل 39 حالة تم فحصهم خلوياً بنجاح بنسبة (82.1%) و 7 حالات بهم اضطراب في إزدواجية الحامض النووي بنسبة (17.9%).وبخصوص نسبة الخلايا في الطور التمهيدي (س) فإنها تعتبر معامل تكميلي مفيد لتصنيف درجة الأورام الغير هودجكن الليمفاوية في عينات ابر الشفط الدقيقة. حيث وجد أن النسبة المرتفعة للطور التمهيدي (س) أكثر من 10% نادراً ما تحدث في الغدد الليمفاوية الحميدة. ولذلك فإن القياس الكمي للحامض النووي الديوكسي ريبوزي يساعد علي التمييز بين الأورام الليمفاوية الخبيثة الضئيلة الدرجة من الأورام المرتفعة الدرجة والتي تحتاج إلي علاج كيمائي مكثف.وفي الدراسة الحالية فإن متوسط نسبة الخلايا في الطور التمهيدي (س) في الأورام الليمفاوية الحميدة كان 4.11% وفي أورام هودجكن الخبيثة كان 9.56% وفي أورام الغير هودجكن الضئيلة الدرجة كان 4.68% ومتوسطة الدرجة كان 14.1% ومرتفعة الدرجة كان 16.96% ومعني ذلك أنه يزيد تدريجياً من النشاط الحميد إلي الخبيث ضئيل درجة ثم متوسطها ثم مرتفعها والذي وجد أنه إحصائياً ذو معني (ب < 0.05) بين النشاط الحميد والأورام الخبيثة عالية الدرجة ومتوسطها وبين الأورام الخبيثة ضئيلة الدرجة ومرتفعة الدرجة ومتوسطها ولكنه غير ذي معني بين النشاط الحميد والأورام الخبيثة ضئيلة الدرجة.
|
|
|